BIOLOGÍA MOLECULAR
1.1 EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN
DE ÁCIDOS NUCLEICOS
NIVEL BÁSICO
DANAEXTRACTOR KIT
Práctica que constituye la introducción a la Biología Molecular. Este kit permite realizar extracciones básicas de ADN a partir de tejidos animales (hígado de pollo) y vegetales.
El kit contiene todo lo necesario para que cada alumno pueda llevar a cabo la práctica individualmente, en la propia clase
> No necesita ningún aparato o material adicional.
NIVEL MEDIO
DANAEXTRACTOR SALIVA 2 Kit
Este kit permite al alumno extraer su propio ADN de una forma rápida y fácil a partir de una pequeña muestra de su saliva sin la necesidad de disponer de una microcentrifuga de laboratorio.
Para la realización de esta práctica es necesario que el laboratorio disponga de micropipetas de 20-200 microlitros y micropipetas de 100-1000 microlitros y sus respectivas punta. Este material puede ser suministrado por separado por BIOTED.
El resto de material necesario para llevar a cabo la práctica individualmente por cada alumno está incluido en el kit.
El ADN aparece como una hebra en la solución que el alumno se lleva a casa.
DNES2-25 25 alumnos
NIVEL AVANZADO
El proceso de extracción implica la lisis celular para liberar los ácidos nucleicos y la inactivación de nucleasas celulares (ADNasas y ARNasas) para evitar la
degradación de los ácidos nucleicos.
El proceso de purificación consiste en separar los ácidos nucleicos de los demás componentes.
Existen diferentes técnicas para realizar la purificación:
A. PRECIPITACIÓN CON SALES (SALTING-OUT)
Precipitación de las proteínas con altas concentraciones de sales
DANAGENE SALIVA KIT
Este kit permite aislar el ADN de la saliva de los alumnos para obtener un ADN con una calidad para ser utilizado en PCR.
> Kit contiene:
Solución de Lisis, solución precipitación de proteínas y solución hidratación ADN.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga, isopropanol y etanol 70%.
DANAGENE BLOOD DNA KIT
Este kit permite aislar el ADN de la sangre de los alumnos para obtener un ADN con una calidad para ser utilizado en PCR.
> Kit contiene:
Solución RBC, solución de Lisis, solución precipitación de proteínas y solución hidratación ADN.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga, isopropanol y etanol 70%.
DANAGENE PLANT DNA KIT
Este kit permite aislar el ADN de diferentes plantas para obtener un ADN con una calidad para ser utilizado en PCR.
> Kit contiene:
Tampón de extracción, solución de Lisis, RNAsa, solución de PVP, solución precipitación de proteínas y solución hidratación ADN.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga, baño de incubación, isopropanol y etanol 70%.
B. CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN.
Se basa en la capacidad de adsorción de los ácidos nucleicos a la membrana de sílice en presencia de sales caotrópicas que vienen en pequeñas columnas. Disponemos de una amplia gama de kits que utilizan columnas, puede visitar www.danagen.es.
A nivel educativo proponemos los siguientes:
DANAGENE SPIN SALIVA DNA KIT
1.DANASALIVA SampleCollection Kit proporciona un procedimiento seguro y rápido todo en uno para la recolección, estabilización y transporte de muestras de saliva de 2 ml a temperatura ambiente que estabiliza el ADN desde el momento de la recolección durante varios meses.
Las muestras de saliva se recogen escupiendo dentro del embudo de recolección que se ha ensamblado con el tubo de recolección. Después de recoger 2 ml de saliva, el contenido de la solución de preservación de saliva se añade y se mezcla con la saliva recogida. El tubo de recolección de saliva se envía al laboratorio para el aislamiento y análisis del ADN utilizando DANAGENE SALIVA DNA Kit o DANAGENE SPIN SALIVA DNA Kit.
2.DANAGENE SPIN SALIVA DNA Kit ha sido diseñado para una purificación rápida y eficiente de ADN total a partir de muestras de saliva conservadas con el DANASALIVA SampleCollection Kit.
Brevemente, se procesan 400 ml de saliva conservada lisando las células con el Tampón de lisis y proteinasa K mediante incubación a 55ºC durante 20 minutos. Después de una centrifugación, se ajustan las condiciones de unión a la membrana de la columna añadiendo etanol y el lisado se añade a la MicroSPin columna. El ADN unido a la columna se somete a 2 pasos de lavados para eliminar los inhibidores. Después de un paso de secado, el ADN se puede eluir con 50 ml Tampón de elución /Tris/HCl 5 mM pH 8.5.
0603.43 1 alumno (kit de recogida)
0603.SPIN50 50 preps
0603.SPIN250 250 preps
Descarga el protocolo de trabajo: DANAGENE SPIN SALIVADNA KIT castellano
DANAGENE SPIN GENOMIC DNA KIT
Este kit está designado para una eficiente y rápida extracción de ADN genómico de alta calidad a partir de una amplia variedad de muestras incluyendo sangre, células en cultivo, tejidos animales, colas de ratón, bacterias y levaduras utilizando para ello MicroSpin columnas con membranas de sílice que unen selectivamente el ADN.
> Kit contiene:
Tampón Lisis Tejidos, Tampón Lisis/Unión, Proteinasa K, Tampón de Desinhibición, Tampón de Lavado, Tampón de Elución y microcolumnas.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga ,baño de incubación, isopropanol y etanol 100%.
DANAGENE SPIN BLOOD DNA KIT
Este kit está designado para una rápida purificación de ADN genómico puro a parir de sangre total, suero, plasma, fluidos corporales y “spots” de sangre seca utilizando Microspin columnas con membrana de sílica a la cual se une selectivamente el ADN. El kit utiliza un nuevo formulado Tampón de lisis/unión específico para la extracción de ADN a partir de muestras de sangre.
> Kit contiene:
Tampón RBC,Tampón Lisis Tejidos, Tampón Lisis/ Unión, Proteinasa K, Tampón de Desinhibición, Tampón de Lavado, Tampón de Elución y microcolumnas.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga ,baño de incubación, isopropanol y etanol 100%.
DANAGENE FFPE DNA KIT
Este kit está optimizado para ser un método rápido de extracción de ADN a partir tejidos embebidos en parafina y fijados con formalina (FFPE). El proceso omite el uso de los inflamables y malolientes xileno y d-limoneno comúnmente utilizado para la desparafinización, en su lugar, se utiliza un TAMPON de DESPARAFINIZACIÓN propio para la completa disolución de la parafina y liberar el tejido.
> Kit contiene:
Tampón Desparafinización ,Tampón Lisis Tejidos, Tampón Lisis/Unión, Proteinasa K, Tampón de Desinhibición, Tampón de Lavado, Tampón de Elución y microcolumnas.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga ,baño de incubación, isopropanol y etanol 100%.
DANAGENE SPIN FOOD-STOOL kit
Este kit ha sido optimizado para una eficiente y rápida purificación de ADN a partir de heces frescas o congeladas, de varias muestras de alimentos (materias primas y alimentos procesados).
> Kit contiene:
Tampón CTAB , Tampón Unión, Proteinasa K, Tampón de Desinhibición, Tampón de Lavado, Tampón de Elución y microcolumnas.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga ,baño de incubación, isopropanol y etanol 100%.
0609.1 50 extracciones
0609.2 250 extracciones
Descarga el protocolo de trabajo: SPIN-FOOD-STOOL-cast#0609
EXTRACCIÓN ADN BACTERIANO KIT
El objetivo de este experimento es introducir los principios de la extracción de ADN cromosómico a partir de células bacterianas de E.coli. Los estudiantes aprenderán la estructura y función de los ácidos nucleicos que contiene una bacteria.
> Kit contiene:
Pellets bacterianos, solución de Lisis, solución precipitación de proteínas y solución hidratación ADN.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga ,baño de incubación, isopropanol y etanol 100%.
EXTRACCIÓN ADN PLASMIDICO KIT
El objetivo de este experimento es introducir los principios de la extracción de ADN plasmídico a partir de células bacterianas. Los estudiantes aprenderán la estructura y función de los plásmidos de ADN.
> Kit contiene:
Pellets bacterianos, Tampón de resuspensión, Tampón de lisis, Tampón neutralización/unión,
Tampón de lavado, Tampón de elución y microcolumnas.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos, microcentrifuga y etanol 100%.
DANAGENE SALIVA RNA Kit
1.DANASALIVA RNA Sample Collection Kit proporciona un procedimiento seguro y rápido todo en uno para la recolección, estabilización y transporte de muestras de saliva de 1 ml a temperatura ambiente que estabiliza el ARN desde el momento de la recolección durante 1 mes.
Las muestras de saliva se recogen escupiendo dentro del embudo de recolección que se ha ensamblado con el tubo de recolección. Después de recoger 1 ml de saliva, el contenido de la solución de preservación de saliva se añade y se mezcla con la saliva recogida. El tubo de recolección de saliva se envía al laboratorio para el aislamiento y análisis del ARN utilizando DANAGENE SALIVA RNA Kit.
2.DANAGENE SALIVA RNA Kit ha sido diseñado para una purificación rápida y eficiente de ARN total a partir de muestras de saliva conservadas.
El proceso incluye una lisis celular con proteinasa K seguida de una precipitación de las proteínas y parte del ADN genómico. Posteriormente, mediante una precipitación con isopropanol, se obtiene el ARN total, que finalmente se rehidrata. Finalmente, para la eliminación del ADN genómico contaminante se utiliza un enfoque que consiste en dos filtraciones secuenciales con diferentes columnas MiroSpin.
AUTOMATIZACIÓN PURIFICACIÓN ÁCIDOS NUCLEICOS
ZiXpress-32® es una plataforma de extracción automatizada compacta y fiable basada en la tecnología Magnetic Pillar (Rod),que puede extraer hasta 32 muestras en 20 a 40 minutos con el uso de partículas magnéticas Zi-Beads® .
Es una plataforma abierta y flexible con certificación CE que permite operar con optimizados kits de reactivos precargados / no precargados con los protocolos ya introducidos, ofreciendo al usuario final la libertad de usarla con los consumibles suministrados o con cualquier otro consumible estándar , y personalizar sus propios protocolos para satisfacer precisamente cualquier necesidad de aplicación.