2.2. ENZIMAS DE RESTRICCIÓN Y CLONACIÓN
INTRODUCCIÓN A LOS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
El objetivo de este experimento es desarrollar el conocimiento de los enzimas de restricción y la electroforesis en gel de agarosa. El kit contiene el material necesario para llevar a cabo la práctica 4 veces con diferentes grupos o clases. Incluye introducción a la técnica, material para la práctica y guía didáctica para el profesor.
Se suministra el ADN del fago lambda ya digerido.
> Kit contiene:
Muestras, TAE 10X, agarosa, micropipeta y puntas , método de tinción.
> Se necesita:
Microondas o placa calefactora, sistema de electroforesis horizontal, balanza y micropipetas para sembrar el gel.
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4 prácticasDIGESTIÓN DEL FAGO LAMBDA CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
El objetivo de este experimento es desarrollar el conocimiento del bacteriófago lambda y la electroforesis en gel de agarosa. El kit contieneel material necesario para llevar a cabo la práctica 4 veces con diferentes grupos o clases. Incluye introducción a la técnica, material para la práctica y guía didáctica para el profesor.
Se suministra el ADN del fago lambda y los enzimas para su digestión. Estos enzimas son especiales
y permiten realizar las digestiones en tan solo 10 minutos con lo que la práctica se puede realizar en poco tiempo.
> Kit contiene:
Muestras, TAE 10X ,agarosa y método de tinción.
> Se necesita:
Microondas o placa calefactora, sistema de electroforesis horizontal, balanza y micropipetas para sembrar el gel.
DETERMINACIÓN DEL MAPA DE UN PLÁSMIDO CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
El objetivo de este experimento es desarrollar el conocimiento del mapaje de ADN determinando los lugares de corte de los enzimas de restricción en un plásmido.
El ADN plasmídico será cortado por varias combinaciones de enzimas de restricción y resuelto mediante electroforesis en gel de agarosa.
> Kit contiene:
Enzimas de restricción, ADN plasmído, tampones, agua, marcador de peso molecular, agarosa, TAE y método de tinción.
> Se necesita:
Microondas o placa calefactora, sistema de electroforesis horizontal, balanza y micropipetas para sembrar el gel.
PURIFICACIÓN DEL ENZIMA DE RESTRICCIÓN Eco RI
En este experimento los estudiantes realmente purifican la enzima de restricción Eco RI. Este procedimiento utiliza un paso de cromatografía de intercambio iónico para la purificación de Eco RI.
Las fracciones de la columna se ensayan para la enzima utilizando ADN del fago Lambda y los productos de la digestión se identifican por electroforesis en gel de agarosa. Las fracciones que contienen Eco RI se identifican y se agrupan. Las actividades totales y específicas se calculan.
> Kit contiene:
Matria de intercambio iónico, columnas de cromatografía, extracto celular de E.coli, tampón de equilibrio y elución, lambda DNA; marcador lambda/Eco RI, KCl, glicerol, tampón de dilución y reacción, agarosa, TAE y método de tinción.
> Se necesita:
Microondas o placa calefactora, sistema de electroforesis horizontal, balanza ,micropipetas para sembrar el gel, baño de agua, transiluminador UV, microcentrifuga, espectrofotómetro y cubetas, pipetas 10 ml, material de vidrio y hielo.el gel y baño de agua.
