1.3. TÉCNICAS DE PCR
Le presentamos una serie de kits para llevar a cabo diferentes aplicaciones prácticas de la técnica de la PCR, cada kit consta de una parte teórica que trabajará el profesor con los alumnos y una parte práctica que consiste en.la PCR y sus resultados.
Los kits incluyen los reactivos para la realización de la electroforesis y su tinción (DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador).
Es necesario disponer de un termociclador para llevar a cabo estas prácticas.
Le podemos suministrar el termociclador de nuestra representada EDVOTEK.
ESTUDIO DE POLIMORFISMOS HUMANOS VNTR POR PCR
Las secuencias de ADN que varían entre los individuos son conocidas como polimorfismos. Los estudiantes preparan sus propios ADN a partir de células bucales que serán utilizados para realizar la PCR y estudiarán el locus DS180 que es un polimorfismo VNTR.
> Kit contiene:
MIX PCR, control positivo, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
DETERMINACIÓN DEL FACTOR Rh POR PCR
Los estudiantes preparan sus propios ADN a partir de células bucales que serán utilizados para realizar la PCR. En una segunda sesión, se analiza el ADN amplificado por electroforesis
y la determinación del factor Rh.
> Kit contiene:
MIX PCR, control positivo, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
PCR2 
25 alumnos
Descarga el protocolo Determinación factor RH.
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
ESTUDIO DE POLIMORFISMOS HUMANOS ALU POR PCR
Las secuencias de ADN que varían entre los individuos son conocidas como polimorfismos. Los estudiantes preparan sus propios ADN a partir de células bucales que serán utilizados para realizar la PCR y estudiarán la presencia o ausencia del locus Alu en el gen activador del plasminógeno.
> Kit contiene:
MIX PCR, control positivo, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
PCR3 25 alumnos
Descarga el protocolo Estudio de polimorfismos ALU.
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
PCR GEN 16S rRNA BACTERIANO
Se suministra todo el material necesario para realizar la amplificación de un fragmento del gen 16S rRNA bacteriano utilizando para ello la técnica de la PCR. No es necesario aislar
el ADN de bacterias ya que se suministra una muestra de ADN bacteriano para llevar a cabo las amplificaciones.
> Kit contiene:
MIX PCR, control positivo, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
PCR4 25 alumnos
Descarga el protocolo de trabajo: PCR gen 16S ARNr bacteriano
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
PCR GEN 18S rRNA HUMANO
Se suministra todo el material necesario para realizar la amplificación de un fragmento del gen 18S rRNA humano utilizando para ello la técnica de la PCR, incluido ADN genómico humano de forma que no es necesario que los alumnos se aíslen su ADN.
> Kit contiene:
MIX PCR, control positivo, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
DETECCIÓN DE MAÍZ TRANSGÉNICO
Se suministra todo el material necesario para realizar la detección del maíz Bt transgénico utilizando para ello la técnica de la PCR. Se suministran varias muestras de maíz en polvo y el kit para la extracción del ADN de estas muestras y de otras posibles elegidas por los alumnos.
> Kit contiene:
Muestra en polvo de maíz, MIX PCR, control positivo ADN normal, control positivo ADN trasngénico, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
PCR6 25 alumnos
Descarga el protocolo de trabajo: DETECCIÓN MAÍZ TRANSGÉNICO
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
EXPLORANDO LA GÉNETICA DEL GUSTO: ANÁLISIS DEL SNP DEL GEN PTC
Las secuencias de ADN que varían entre los individuos son conocidas como polimorfismos. Los estudiantes prepararán sus propio ADN a partir de células bucales que será utilizado para realizar la amplificación del gen TAS2R38, el cual es responsable de la capacidad de detectar el sabor amargo. Posteriormente, se realizará la purificación del producto de PCR y se digerirá con el enzima de restricción HaeIII para identificar la presencia o ausencia del SNP vinculado al fenotipo de detectar el sabor amargo en papeles de PTC.
> Kit contiene:
MIX PCR, controles positivos, agarosa, TAE, GELSAFE, Kit purificación fragmento PCR, enzima de restricción HaeIII y papeles de control.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador, microcentrífuga y baño de agua para incubación a 37ºC.
INTRODUCCIÓN A LA PCR EN TIEMPO REAL
Este kit es una introducción a la PCR en tiempo real. Los estudiantes podrán preparar curvas estándar y cuantificar muestras problema . El producto amplificado acumulado se puede detectar en cada ciclo con colorantes fluorescentes.
Se presenta como microtubos listos y contienen todos los componentes necesarios para realizar el análisis de PCR cuantitativa
> Kit contiene:
Microtubos individuales que contienen una mezcla deshidratada de cebadores específicos y una sonda marcada, Agua libre de nucleasas, Estándar y Tampón del estándar.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos de PCR y Real Time Machine.
DETECCIÓN DE ESTREPTOCOCOS SALIVARIUS Y S. ORALIS EN LA SALIVA POR PCR
Los estudiantes preparan sus propios ADN’s a partir de células bucales que serán utilizados para realizar la PCR para la detección de bacterias presentes en la cavidad oral.
Los estudiantes adquirirán conocimientos básicos sobre la biología y microbiología de las bacterias de la cavidad oral.
> Kit contiene:
Muestra, MIX PCR, control positivo ADN, agarosa, TAE y DANABLUE-FLASHBLUE o GELSAFE si se dispone de transiluminador.
> Se necesita:
Micropipetas, microtubos PCR, termociclador.
PCR10 25 alumnos
Descarga el protocolo de trabajo: DETECCION STREPTOCOCUS por PCR
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
DETECCIÓN DE COVID-19 POR RT-qPCR
El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes a nivel teórico en algunas variantes de la PCR, como es amplificar fragmentos de ARN (RT-PCR) y cuantificar la concentración de una molécula concreta de ácido nucleico presente en una muestra (PCR cuantitativa o PCR a tiempo real).
Los estudiantes adquirirán conocimientos básicos sobre la biología molecular y realizarán una simulación mediante PCR estándar para la detección del Covid-19.
> Kit contiene:
Muestras, MIX PCR, control positivo, control negativo, agarosa, TAE y GELSAFE.
> Se necesita:
Micropipetas, transiluminador, microtubos PCR, termociclador.
PCR12 25 alumnos
Descarga el protocolo de trabajo: DETECCION-COVID-RT-qPCR2
Descarga el protocolo de trabajo: PREPARACION GEL DE AGAROSA
